基于nano LC-MS/MS法的黄明胶胶原蛋白鉴定研究

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究黄明胶中胶原类物质组成,探讨其胶原蛋白的修饰。方法采用胰蛋白酶酶切黄明胶样品,纳升液相串联质谱(nano-LC Q Exactive Orbitrap MS)技术,对黄明胶酶解液进行分析获得MS/MS图谱,利用PEAKS软件对获得的MS/MS图谱搜索牛科蛋白质库,以鉴定其中蛋白质组成。结果从2个批次的黄明胶酶解液样品中鉴定了1 378个肽段,共鉴定了30蛋白质,胶原Ⅰ蛋白α1链、α2链,胶原Ⅲ蛋白α1链为黄明胶的主要物质基础,研究发现黄明胶中蛋白主要有4种修饰形式:羟基化(Hydroxylation)、脱酰胺化(Deamidation)、N-端酰胺化(Acetylation)及氧化(Oxidation)修饰。结论黄明胶的主要物质基础源于胶原Ⅰ蛋白和胶原Ⅲ蛋白,胶原蛋白经熬制后,变性、溶出、修饰获得的产物共同构成了黄明胶的物质基础。

【关键词】 黄明胶 胶原蛋白 鉴定 修饰 物质基础

阅读全文